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Annealing Buffer for DNA Oligos 退火缓冲液(5×)
 产品货号: RTE3105
 产品名称: Annealing Buffer for DNA Oligos 退火缓冲液(5×)
 产品价格/规格: 5×1ml
 产品说明书: 暂无
 更新时间: 2020-01-06
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    ●     产品组成:

    货号

    名称

    规格

    贮存

    RTE3105

    DNA退火缓冲液(5×)

    5×1ml

    -20

    保存:-20

    产品简介:

    DNA寡核苷酸退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos)简称为DNA退火缓冲液,是一种可用于DNA oligo退火的缓冲液,可用于常规的DNA oligo的退火,尤其适合于较难退火的用于RNAi (也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。该缓冲液能有效避免DNA oligo自身形成发夹结构,并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接,转化后可以得到大量的阳性克隆。

    本试剂操作简单,只需把待退火的DNA oligo和退火缓冲液按照一定比例混合后,置于PCR仪上进行程序降温,约90min即可完成。

    操作步骤(仅供参考):

    1、 把待退火的DNA oligo用经灭菌水配制成50μM,同时彻底溶解退火缓冲液(5×)备用。

    2、 按如下反应体系操作:

    顺序

    组份

    体积

    1

    灭菌水

    40μl

    2

    退火缓冲液(5×)

    20μl

    3

    DNA oligo A(50μM)

    20μl

    4

    DNA oligo B(50μM)

    20μl

     

    Total

    100μl

    按照上述顺序,依次加入并混匀,如果所用PCR仪没有加热盖,可加入Mineral Oil防止液体挥发。

    3、 按如下PCR仪的退火条件:

    步骤

    温度

    时间

    作用

    1

    95℃

    2min

    Oligo充分变性

    2

    90s下降1℃,降至25℃

    90min

    程序退火

    3

    -20℃

    长期保存

    暂时存放

    注:如果使用的PCR仪无梯度降温功能,也可以95℃处理后自然冷却至常温。


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